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擬南芥種苗

擬南芥Col-0種子

產(chǎn)品規(guī)格

貨號

名稱

規(guī)格

保存條件

AS5001

擬南芥Col-0種子

0.2ml/, 0.5ml/, 1ml/

4

產(chǎn)品說明

擬南芥(Arabidopsis thaliana) 屬于十字花科,是二年生草本植物在生物實驗中擬南芥經(jīng)常被選擇作為模式植物,原因有三:首先,擬南芥只有5對染色體,數(shù)目很??;其次,擬南芥發(fā)育生長周期極快,在短期內(nèi)就能繁育很多代,滿足變異和進化的要求,最后擬南芥每次生產(chǎn)數(shù)千枚種子滿足遺傳上統(tǒng)計的要求。擬南芥的基因組是目前已知植物基因組中最小的大約為12500萬堿基對。擬南芥植株小、結(jié)子多、自花受粉,基因高度純合,并且種植方便,生長周期短,條件易得,遺傳轉(zhuǎn)化方法簡單,是進行遺傳學研究的理想材料,被科學家譽為“植物中的果蠅”。擬南芥無菌培養(yǎng),普遍使用的是1倍或0.5倍濃度的MS培養(yǎng)基,也有使用GamborgB5培養(yǎng)基。

操作方法

1. 取保存的野生型種子適量,倒入1.5ml的離心管中,加入無菌水,震蕩數(shù)次,高速離心15s,將上清及漂浮的種子棄掉。

2. 向離心管中加入1ml70%乙醇,震蕩10s,用移液器小心地移除上清。

3. 向離心管中加入1ml的無菌去離子水ddH2O,震蕩后吸除,重復兩次。

4. 向離心管中加入1ml3%次氯酸鈉溶液,在渦旋振蕩器上強力震蕩10min,用移液器小心地移除上清。

5. 向離心管中加入1ml的無菌去離子水ddH2O,震蕩后吸除,重復3次以上。

6. 向離心管中加入500μl的無菌去離子水ddH2O,震蕩后,將種子傾倒在含有無菌濾紙的培養(yǎng)皿中。

7. 待水稍干以后,用小鑷子取擬南芥種子點種到已經(jīng)晾干的MS培養(yǎng)基平板上。

8. 用封口膜封好培養(yǎng)皿,寫好標簽。

9. 將封好的平板放到4的冰箱2-3d,進行春化處理,打破種子休眠期。

10. 將春化處理后的平板放入組織培養(yǎng)室(22-23),培養(yǎng)3-4d,種子即萌發(fā)。

11. 在培養(yǎng)室培養(yǎng) 7-10d,幼苗長出兩片真葉以后,即可進行大量移栽。

注意事項

1. 因幼苗長出真葉后即可移栽,MS培養(yǎng)基的蔗糖含量控制在1-2%即可。

2. 70%乙醇進行種子表面消毒時,時間不宜過長,因為擬南芥種皮較薄,乙醇極易滲入,殺傷種子。

3. 點種種子時,避免種子擠到一起,防止根交錯到一起。

4. 如果種子收獲后超過3個月,可以不用進行春化處理。

5. 放置培養(yǎng)皿時,前幾天可以倒置放置,當根生成后改為平放,防止根向上生長。

6. MS培養(yǎng)基可用B5培養(yǎng)基代替。

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